中华皮肤科杂志 ›› 2018, Vol. 51 ›› Issue (4): 260-264.doi: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.04.004
许新雅1,郑跃2,许庆芳2,黎钰莹1,黄云芬1,龚子鉴1,陆春3,赖维4
摘要: 目的 探讨光老化对皮肤成纤维细胞降解胞内晚期糖基化终末产物(AGE)的影响。方法 连续长波紫外线(UVA)照射诱导成纤维细胞光老化,通过CCK8法、β半乳糖苷酶染色及细胞凋亡率检测验证模型是否构建成功。取原代成纤维细胞分为4组:光老化组(以UVA照射诱导光老化),非光老化组(不做处理),光老化 + AGE组(以UVA照射诱导光老化后加入200 mg/L AGE?BSA孵育),非光老化 + AGE组(未诱导光老化细胞中加入200 mg/L AGE?BSA孵育),孵育4 ~ 72 h后,流式细胞仪检测各组细胞内AGE?BSA荧光强度,激光扫描共聚焦显微镜定位、半定量各组细胞8 h点胞内AGE?BSA。ELISA检测各组细胞24 h内AGE?BSA浓度变化。结果 与对照组(未照射UVA)相比,UVA照射组细胞增殖活性显著下降(t = 7.559,P < 0.05),而凋亡率及β半乳糖苷酶染色阳性率显著升高(t值分别为14.075、43.524,均P < 0.05)。流式细胞仪检测示,孵育4、8、16、24、48、72 h后,光老化 + AGE组AGE?BSA平均荧光强度分别为293 ± 8.19、359.67 ± 11.59、347 ± 12.29、338 ± 12.77,334.67 ± 14.22、336.3 ± 10.21,非光老化 + AGE组分别为222.33 ± 8.74、276.33 ± 6.11、256.33 ± 5.51、243 ± 10.15,236.33 ± 1.53、240.33 ± 1.52,均分别高于相应时间点光老化组和非光老化组,差异均有统计学意义(P < 0.05)。其中光老化 + AGE组AGE?BSA平均荧光强度显著高于相应非光老化 + AGE组细胞(P < 0.05)。激光扫描共聚焦显微镜观察发现,吞入胞内的AGE?BSA主要位于溶酶体内,光老化 + AGE组AGE?BSA荧光强度显著高于非光老化 + AGE组,P < 0.05。ELISA检测发现,32 h点非光老化 + AGE组细胞AGE浓度较8 h点下降(14.6 ± 1.2)%,显著高于光老化 + AGE组(t = 6.604,P < 0.05)。结论 光老化皮肤成纤维细胞对吞入胞内AGE?BSA的降解能力下降,可能致AGE在光老化皮肤堆积。
中图分类号:
许新雅 郑跃 许庆芳 黎钰莹 黄云芬 龚子鉴 陆春 赖维. 光老化对皮肤成纤维细胞降解晚期糖基化终末产物的影响[J]. 中华皮肤科杂志, 2018,51(4):260-264. doi:10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.04.004