中华皮肤科杂志 ›› 2014, Vol. 47 ›› Issue (4): 237-242.
胡燕燕1,赵宏伟2,周炳荣3,方晓波4,骆丹5,吴志韵2,尹慧斌6,吴维7,张家安8
摘要: 【摘要】 目的 研究芒果苷是否对反复亚毒性剂量中波紫外线(UVB)诱导的人二倍体成纤维细胞的早衰起抑制作用及其可能的机制。 方法 实验分成空白对照组(不做处理),UVB-应激诱导的提前衰老(SIPS)组(单纯照光),芒果苷4.0 mg/L组(单纯加药),UVB + 芒果苷1.0 mg/L组、UVB + 芒果苷2.0 mg/L组、UVB + 芒果苷4.0 mg/L组(UVB照射联合药物处理)。成纤维细胞经5次UVB 10 mJ/cm2照射后,用细胞计数法(CCK8法)检测细胞增殖活性,β半乳糖苷酶染色(SA-β-Ga1)计算衰老细胞百分比,流式细胞仪测定细胞周期,蛋白印迹检测衰老相关蛋白p53、p21、p16含量,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶3(MMP3)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA和衰老相关基因p53、p21、p16 mRNA表达。采用单因素方差分析进行数据统计分析。 结果 UVB + 芒果苷1.0 mg/L组、UVB + 芒果苷2.0 mg/L组、UVB + 芒果苷4.0 mg/L组以及UVB-SIPS组细胞增殖活性(A450)依次为0.322 9 ± 0.011 3、0.336 1 ± 0.016 3、0.342 6 ± 0.014 4、0.288 2 ± 0.020 7(F = 110.08,P < 0.05),β半乳糖苷酶染色阳性率依次为(88.83 ± 4.54)%、(46.33 ± 5.51)%、(32.17 ± 6.05)%、(93.67 ± 3.75)%(F = 283.54,P < 0.05;与UVB-SIPS组比较,除UVB + 芒果苷1.0 mg/L组外,其他两组均P < 0.05);G1期细胞阻滞率依次为(72.19 ± 3.42)%、(60.99 ± 2.70)%、(49.80 ± 2.10)%、(82.09 ± 0.89)%(F = 156.01,P < 0.05)。与UVB-SIPS组相比,UVB + 各浓度芒果苷组细胞MMP1和MMP3 mRNA表达降低(F = 69.41、106.41,均P < 0.05),Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA表达增加(F = 66.41、46.81,除UVB + 芒果苷1.0 mg/L组P > 0.05外,其他各组均P < 0.05),衰老相关基因p53、p21、p16 mRNA表达降低(F = 265.60、151.82、329.85,均P < 0.05),衰老相关蛋白p53、p21和p16的合成减少(F = 160.51、158.53、75.38,均P < 0.05),各指标检测值的变化与芒果苷浓度之间呈一定依赖性。 结论 芒果苷可能通过下调p53、p21、p16基因的表达来抑制UVB诱导的人二倍体成纤维细胞的早衰。