摘要:
目的 探讨二甲双胍对角质形成细胞增殖的影响及其可能的作用机制。 方法 以HaCaT细胞为研究对象,分别给予不同浓度二甲双胍(25、50、75、100 mmol/L)刺激24 h,CCK8法检测HaCaT细胞增殖活性;实时定量PCR法检测HaCaT细胞中miR-21-5p及其下游靶基因PDCD4 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测HaCaT细胞中PDCD4蛋白表达水平。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。 结果 二甲双胍可抑制HaCaT细胞增殖,25、50、75、100 mmol/L二甲双胍作用于HaCaT细胞24 h后,细胞抑制率分别为5.43% ± 3.67%、19.61% ± 6.95%、45.93% ± 9.56%、61.91% ± 6.93%,各组细胞抑制率差异有统计学意义(F = 246.90,P < 0.05);25 mmol/L组与对照组(0.00% ± 3.00%)相比,差异无统计学意义,其余各组抑制率均较对照组显著增高(P < 0.05);实验组不同浓度组间比较,差异也均有统计学意义(P < 0.05)。25、50、75、100 mmol/L二甲双胍实验组miR-21-5p mRNA相对表达量(2-?驻?驻Ct)分别为0.90 ± 0.11、0.33 ± 0.05、0.21 ± 0.07、0.14 ± 0.04,PDCD4 mRNA相对表达量(2-?驻?驻Ct)分别为2.11 ± 0.64、7.22 ± 1.13、11.16 ± 1.23、19.12 ± 3.16,各组细胞miR-21-5p mRNA和PDCD4 mRNA的表达差异均有统计学意义(F值分别为36.99和96.26,均P < 0.05);25 mmol/L组与对照组相比,差异无统计学意义,其余各组miR-21-5p及PDCD4 mRNA的表达均较对照组显著下调或上调(均P < 0.05);实验组不同浓度组间比较,差异也均有统计学意义(P < 0.05)。与对照组相比,25、50、75、100 mmol/L二甲双胍实验组PDCD4蛋白表达明显升高,其相对表达量分别为1.22 ± 0.08、2.09 ± 0.20、2.26 ± 0.11、2.37 ± 0.07,组间表达差异有统计学意义(F = 75.37,P < 0.05)。25 mmol/L组与对照组相比差异无统计学意义,其余各组均较对照组明显升高(P < 0.01)。 结论 二甲双胍在体外能够显著抑制HaCaT细胞的增殖,可能通过下调miR-21-5p的表达,使其下游靶基因PDCD4表达上调,从而发挥抑制细胞增殖的作用。
中图分类号:
江萌 马伟元 孙青. 二甲双胍对HaCaT细胞增殖及miR-21-5p和PDCD4表达的影响[J]. 中华皮肤科杂志, 2015,48(3):200-203. doi: