摘要: 目的 观察Rab23分子对鳞状细胞癌(简称鳞癌)细胞Sa3增殖的影响及机制。 方法 将鳞状细胞癌Sa3细胞分为4组:正常对照组[转染绿色荧光蛋白(eGFP)]、Rab23过表达组(转染eGFP标记的Rab23过表达质粒)、Rab23沉默组(转染Rab23 shRNA质粒)、Rab23空载体组(转染空载体)。平板克隆形成实验、流式细胞仪检测Rab23过表达和沉默对Sa3细胞增殖能力的影响。Western印迹检测Rab23过表达和沉默对Sa3细胞Erk/p-Erk表达水平的变化。两组间均数比较采用t检验,多组间均数比较采用单因素方差分析,多组资料两两比较使用Bonferroni′s多重比较分析。 结果 通过构建质粒、慢病毒感染,获得Rab23过表达和Rab23沉默的稳定Sa3细胞株。平板克隆形成实验结果显示,Rab23过表达组克隆形成率为2.3% ± 0.2%,与正常对照组(3.6% ± 0.3%)相比,Sa3细胞增殖能力降低(P < 0.05),而Rab23沉默组克隆形成率(4.1% ± 0.2%)较空载体组(1.8% ± 0.0%)增殖能力明显提高(P < 0.01)。细胞周期检测显示,Rab23过表达可引起Sa3细胞G1期阻滞,Rab23过表达组增殖指数(0.581 ± 0.035)较正常对照组(0.698 ± 0.018)降低(P < 0.05),而Rab23沉默组增殖指数(0.567 ± 0.015)较空载体组(0.444 ± 0.014)明显提高(P < 0.01)。Western 印迹结果显示,与正常对照组相比,Rab23过表达组和Rab23沉默组Sa3细胞Erk表达水平无变化,但Rab23过表达组磷酸化Erk表达水平较正常对照组降低,Rab23沉默组磷酸化Erk表达水平较空载体组升高。 结论 Rab23对鳞癌Sa3细胞增殖起抑制作用,这种抑制作用可能与Erk通路有关。
中图分类号:
刘曦霖 简强 苗叶 黄敏 李承新. Rab23对鳞状细胞癌Sa3细胞增殖的抑制作用及相关机制[J]. 中华皮肤科杂志, 2014,47(7):499-502. doi: