中华皮肤科杂志 ›› 2013, Vol. 46 ›› Issue (12): 881-884.
黄丹1,任发亮2,陈旭3,陈崑4,顾恒3
HUANG Dan1,Fa-Liang REN2,
摘要: 【摘要】 目的 观察HaCaT细胞和原代角质形成细胞接受不同剂量中波紫外线(UVB)照射后细胞增殖活力和自噬体表达水平的变化,并初步评估增殖活力损伤程度和自噬体表达水平之间的相关性。 方法 两种细胞各分为5组,对照组、5、10、20、40 mJ/cm2 UVB照射组,照射结束后12 h进行MTT实验或单丹(磺)酰戊二胺(MDC)染色,全波长酶标仪下读取各孔A值,倒置荧光显微镜下随机选取视野,计数每视野下自噬体表达阴性细胞和阳性细胞数目。 结果 经不同剂量UVB照射后,HaCaT细胞的增殖活力(A值)较原代角质形成细胞下降更明显,其中HaCaT细胞10、20、40 mJ/cm2照射组(A值分别为1.367 ± 0.035、1.173 ± 0.034、0.873 ± 0.025)两两之间以及与对照组(1.519 ± 0.022)之间差异均有统计学意义(P < 0.01);原代角质形成细胞仅10、20、40 mJ/cm2 UVB照射组(A值分别为0.782 ± 0.012、0.773 ± 0.021、0.725 ± 0.031)与对照组(0.887 ± 0.035)之间差异有统计学意义(P < 0.05)。5、10、20 mJ/cm2 UVB照射后两种细胞MDC染色,自噬体表达阳性的细胞比率均出现增加,但照射量至40 mJ/cm2时则出现下降,以原代角质形成细胞下降更明显,其中HaCaT细胞10 mJ/cm2和20 mJ/cm2 UVB照射组自噬体表达阳性率(分别为22.69% ± 2.15%、28.10% ± 2.92%)较对照组(10.18% ± 1.50%)有显著上升,而40 mJ/cm2组自噬体表达上升幅度出现下降(趋势卡方检验χ2 = 27.48,P < 0.01);原代角质形成细胞对照组、5、10、20 mJ/cm2组间自噬体阳性率变化不大,但40 mJ/cm2组表达出现明显抑制(趋势卡方检验χ2 = 6.86,P < 0.01)。 结论 UVB对HaCaT细胞和原代角质形成细胞增殖活力的损伤均有剂量依赖性,原代角质形成细胞更耐受UVB损伤;5、10、20 mJ/cm2 UVB照射能促进HaCaT细胞自噬体表达增加,且有剂量依赖性,而对原代角质形成细胞自噬体表达水平未产生显著影响;40 mJ/cm2 UVB照射后HaCaT细胞自噬体表达有下降趋势,而显著抑制原代角质形成细胞自噬体水平的表达。 【关键词】 角质形成细胞; 自噬体; 紫外线