中华皮肤科杂志 ›› 2022, Vol. 55 ›› Issue (1): 12-15.doi: 10.35541/cjd.20201126
王媛 余美文 向睿宇 李锁 李志量 荆可 张寒梅 冯素英
Wang Yuan, Yu Meiwen, Xiang Ruiyu, Li Suo, Li Zhiliang, Jin Ke, Zhang Hanmei, Feng Suying
摘要: 【摘要】 目的 优化盐裂皮肤-间接免疫荧光方法(IIF-SSS),评价其在大疱性类天疱疮(BP)抗体检测中的应用。方法 通过调整试验条件,利用正常人包皮或非包皮皮肤制备盐裂底物,分为3组:传统组在4 ℃旋转皮肤48 ~ 72 h;低温浸泡组在4 ℃浸泡皮肤48 ~ 72 h;室温浸泡组在室温25 ℃(23 ℃ ~ 27 ℃)浸泡皮肤24 h。收集2019年8月至2020年8月中国医学科学院皮肤病医院确诊的20例BP患者血清,采用倍比稀释法,利用上述3种试验条件制备的盐裂底物、未盐裂底物进行IIF检测。采用配对样本t检验进行两配对样本的比较。结果 低温浸泡组在48 ~ 72 h未出现真表皮分裂;室温浸泡组非包皮盐裂底物与传统组一样,真表皮分裂界面位于透明板下部。20例BP患者血清,在室温浸泡组盐裂非包皮皮肤、盐裂包皮及传统组盐裂非包皮皮肤这3种底物上,抗体滴度的倒数M(Q1,Q3)分别为5 120(2 560,17 920)、1 280(640,2 560)、1 280(640,2 560)。室温浸泡组制备的盐裂皮肤效果优于传统组,其中19例(95%)BP患者的滴定抗体滴度比传统盐裂方法高出1 ~ 5个倍比稀释度,差异有统计学意义(t = 8.04,P<0.001);而室温浸泡组制备的盐裂包皮与传统组相比,抗体滴度差异无统计学意义(t<0.001,P>0.05)。在以正常未行盐裂的皮肤及包皮为底物的常规IIF中,抗体滴度的倒数分别为320(160,640)、480(160,1 120);室温浸泡组盐裂包皮、非包皮皮肤及传统组盐裂非包皮皮肤这3种底物上 IIF检测的抗体滴度与常规IIF检测的抗体滴度一致或高出1 ~ 7个倍比稀释度,差异有统计学意义(t = 6.47、14.83、5.26,均P<0.001)。结论 采用室温25 ℃(23 ℃ ~ 27 ℃)浸泡法来制备盐裂底物,不仅耗时短,流程简单,而且检测BP抗体的敏感性等于甚至优于传统盐裂方法。
王媛 余美文 向睿宇 李锁 李志量 荆可 张寒梅 冯素英. 盐裂皮肤-间接免疫荧光方法优化及在大疱性类天疱疮抗体检测中的应用[J]. 中华皮肤科杂志, 2022,55(1):12-15. doi:10.35541/cjd.20201126
Wang Yuan, Yu Meiwen, Xiang Ruiyu, Li Suo, Li Zhiliang, Jin Ke, Zhang Hanmei, Feng Suying. Optimization of indirect immunofluorescence on salt-split skin and its application in detection of bullous pemphigoid antibodies[J]. Chinese Journal of Dermatology, 2022, 55(1): 12-15.doi:10.35541/cjd.20201126