中华皮肤科杂志 ›› 2019, Vol. 52 ›› Issue (7): 486-490.doi: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2019.07.008
李凌佳 刘彤云
Li Lingjia, Liu Tongyun
摘要: 【摘要】 目的 观察胱天蛋白酶14(caspase-14)在慢性光化性皮炎(CAD)患者皮损中的表达以及中波紫外线(UVB)对HaCaT细胞caspase-14 mRNA和蛋白表达的影响。方法 2016年在昆明医科大学第一附属医院皮肤科门诊收集慢性光化性皮炎、湿疹患者皮损各10份作为试验组和阳性对照组,以10例健康人整形手术后的正常皮肤组织作为阴性对照。免疫组化染色检测caspase-14在正常皮肤、CAD及湿疹皮损中的表达。培养HaCaT细胞,分别给予0、30、60、90 mJ/cm2 UVB照射,加或不加甲基化酶抑制剂(5-AzaC)培养24 h后提取细胞,实时荧光定量PCR、Western印迹法检测UVB照射及加入5-AzaC 前后HaCaT细胞caspase-14 mRNA和蛋白表达水平。采用SPSS22.0软件,率的比较采用卡方检验,组间均数比较采用t检验和双因素方差分析。结果 在CAD和湿疹皮损内,caspase-14主要表达于棘层和颗粒层,角质层不表达;正常皮肤组织角质层中caspase-14表达显著。10例CAD患者中5例皮损caspase-14阳性,10例健康人中9例阳性,两组阳性比例差异有统计学意义(χ2 = 7.30,P < 0.05)。实时荧光定量PCR及Western印迹检测显示,不同剂量UVB照射后caspase-14 mRNA、蛋白的表达差异均有统计学意义(F值分别为87.54、23.46,均P < 0.05),caspase-14 mRNA、蛋白的表达随UVB剂量升高有下降趋势。UVB剂量为0、30、60、90 mJ/cm2时,5-AzaC组的caspase-14 mRNA、蛋白的表达均高于UVB照射不加5-AzaC的对照组(均P < 0.05)。结论 CAD皮损中caspase-14表达降低,角质层不表达;UVB照射可下调HaCaT细胞caspase-14 mRNA及蛋白表达水平。