中华皮肤科杂志 ›› 2008, Vol. 41 ›› Issue (12): 810-813.
王辉 孔繁荣 周小勇 曾宪玉 王玮蓁 段逸群 曾志良 陈春梅 琳 吉尔伯特
Wang Hui
摘要: 目的 建立多重PCR结合反向线点杂交技术同时检测淋球菌、 沙眼衣原体、生殖支原体、人型支原体、微小脲原体、解脲脲原体和毛滴虫的方法。方法 设计7对生物素标记的上述病原体特异性引物同时扩增病原体靶基因。扩增产物与预先标记在尼龙膜上的特异性探针杂交、显影,判读结果。多重PCR结合反向线点杂交方法检测211个尿道、宫颈分泌物临床标本(男107例,女104例),并与传统单一引物PCR检测结果比较,评价反向线点杂交的敏感性和特异性。结果 多重PCR结合反向线点杂交技术能敏感和特异地检测所有这7种病原体标准株,能敏感地检测病原体100拷贝的靶基因。在211个临床标本的检测中,2.8% (6 /211)的标本使用多重PCR结合反向线点杂交技术检测为阳性,而单一引物PCR检测为阴性,再使用巢式PCR检测这6个标本,结果为阳性。结论 多重PCR结合反向线点杂交技术能快速、敏感和特异地检测多种性病病原体。