中华皮肤科杂志 ›› 2018, Vol. 51 ›› Issue (4): 274-278.doi: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.04.007
邓蕙妍1,李华平1,陈荃1,李润祥1,梁碧华1,高爱莉2,周欣1,朱慧兰3
Hui-Yan DENG 2,Quan Chen3,Runxiang Li2, 4, 2, huilan zhu
摘要: 目的 探讨紫檀芪对HaCaT细胞急性中波紫外线(UVB)损伤的防御作用及相关机制。方法 MTS法和流式细胞仪检测不同浓度紫檀芪作用后HaCaT细胞增殖活性及凋亡与坏死率,筛选无毒性紫檀芪浓度。HaCaT细胞随机分为对照组(不做任何处理)、UVB组和2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪组及2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪 + UVB组。Western印迹法检测紫檀芪和UVB处理前后HaCaT细胞内Nrf2核转位情况,定量PCR检测过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达,ELISA检测CAT和SOD活性。结果 MTS法和流式细胞仪检测结果显示,2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪对HaCaT细胞无毒性作用。对照组Nrf2胞质蛋白1.03 ± 0.08、胞核蛋白1.04 ± 0.11;与对照组比较,2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪组Nrf2胞质蛋白和胞核蛋白均无明显变化,UVB组Nrf2胞质蛋白无明显变化,但Nrf2胞核蛋白显著增加(1.77 ± 0.08,q = 17.24,P < 0.01)。与对照组及UVB组比较,2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪 + UVB组Nrf2胞质蛋白浓度均显著下降(0.86 ± 0.10、0.87 ± 0.11、0.46 ± 0.11,均P < 0.05),胞核蛋白浓度则显著升高(2.38 ± 0.11、2.57 ± 0.11、2.07 ± 0.13,均P < 0.01)。qPCR显示,与对照组相比,UVB照射对CAT mRNA表达有明显的抑制作用(P < 0.05),对SOD mRNA表达则无明显影响(P > 0.05),2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪组CAT和SOD的表达亦均无明显变化(P > 0.05)。然而,2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪可减轻UVB对CAT表达的抑制(P < 0.05),并上调SOD的表达(P < 0.05)。ELISA显示,UVB照射可显著降低HaCaT细胞内CAT和SOD活性(均P < 0.001),2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪可减轻UVB对CAT和SOD活性的抑制作用(P < 0.05),但其活性仍明显低于对照组(P < 0.05)。结论 紫檀芪可通过激活Nrf2通路,上调其下游抗氧化物酶CAT、SOD表达,防御HaCaT细胞急性UVB损伤。
邓蕙妍 李华平 陈荃 李润祥 梁碧华 高爱莉 周欣 朱慧兰. 紫檀芪对中波紫外线照射的HaCaT细胞抗氧化物酶表达及活性的影响[J]. 中华皮肤科杂志, 2018,51(4):274-278. doi:10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.04.007
Hui-Yan DENG Quan Chen Runxiang Li huilan zhu. Effect of pterostilbene on the and activity of antioxidant enzymes in ultraviolet B-radiated HaCaT Cells[J]. Chinese Journal of Dermatology, 2018, 51(4): 274-278.doi:10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.04.007