中华皮肤科杂志 ›› 2016, Vol. 49 ›› Issue (11): 771-775.
孙悦鑫1,周映2,包军3
Yuexin SUN1, 1,Jun Bao
摘要:
目的 观察JAK2/STAT3信号通路选择性抑制剂AG490对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)生物行为学的影响及可能机制。方法 将体外培养的人正常真皮成纤维细胞(HSF)、HKF分别用浓度为12.5、25、50、75、100 μmol/L AG490处理为实验组,以不加AG490组为阴性对照组。CCK?8检测各实验组和阴性对照组HSF和HKF培养24、48、72 h后的细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测各组HKF培养24 h后的细胞周期分布及细胞凋亡;RT?PCR检测各组HKF培养24 h后,STAT3、细胞周期蛋白D1 mRNA的表达情况,同时检测不予任何药物处理的HSF、HKF中STAT3 mRNA表达;Western印迹法检测各组HSF、HKF培养24 h后STAT3、p?STAT3蛋白表达情况。结果 CCK?8法显示,随AG490药物浓度的增加和作用时间的延长,AG490对HSF、HKF增殖的抑制率增加,且该抑制作用呈浓度和时间依赖性(均P < 0.05)。在相同浓度AG490作用相同时间的情况下,HKF增殖抑制率大于HSF(P < 0.05)。流式细胞仪显示,随AG490药物浓度的增加,HKF G1期细胞比例逐渐增加(P < 0.01),G2期细胞比例逐渐减少(P < 0.01),S期细胞无明显变化(P > 0.05),细胞凋亡率逐渐增加(P < 0.01)。RT?PCR显示,在不予任何加药处理的情况下,体外正常培养HSF、HKF 24 h后,HKF组STAT3 mRNA相对表达量显著高于HSF组(P < 0.05)。AG490作用HKF 24 h后,STAT3、细胞周期蛋白D1 mRNA相对表达量随AG490浓度的增加而逐渐降低。相关分析显示,经AG490处理的HKF细胞中细胞周期蛋白D1 mRNA的表达量与STAT3 mRNA的表达量呈正相关(r = 0.855,P < 0.01)。Western印迹显示,随AG490药物浓度的增加,HSF、HKF中STAT3、 p?STAT3的表达均逐渐降低(P < 0.05),且HKF中STAT3、p?STAT3蛋白表达量低于HSF(P < 0.05)。结论 AG490可通过选择性阻断JAK2/STAT3信号通路,有效抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖。
中图分类号:
孙悦鑫 周映 包军. JAK2/STAT3信号通路选择性抑制剂AG490对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的生物行为学影响及可能机制[J]. 中华皮肤科杂志, 2016,49(11):771-775. doi:
Yuexin SUN Jun Bao. Effects of a selective inhibitor of JAK2/STAT3 signaling pathway, AG490, on the biological behavior of human keloid-derived fibroblasts and their possible mechanisms[J]. Chinese Journal of Dermatology, 2016, 49(11): 771-775.doi: