CD147siRNA表达载体的构建与鉴定

中华皮肤科杂志 ›› 2005, Vol. 38 ›› Issue (6): 368-370.

CD147siRNA表达载体的构建与鉴定

陈翔, 颜克香, 谢红付, 李吉

中南大学湘雅医院皮肤科长沙 410008

收稿日期:2004-05-18 出版日期:2005-06-15 发布日期:2005-06-15
基金资助:
国家自然科学基金(30200248);教育部留学回国人员科研启动基金;教育部高等院校青年教师基金(2003-189);霍英东高校青年教师基金(91040);湖南省自然科学基金(02jjy4018)

Construction and Identification of CD147 siRNA Expression Vector

CHEN Xiang, YAN Ke-xiang, XIE Hong-fu, LI Ji

Department of Dermatology, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410008, China

Received:2004-05-18 Online:2005-06-15 Published:2005-06-15

摘要/Abstract

摘要： 目的构建CD147siRNA表达载体,分析CD147在皮肤肿瘤浸润和转移中的作用机制。方法根据基因库上的CD147 cDNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSUPER质粒中,并对重组质粒(命名为pSUPER/CD147 siRNA)进行酶切、PCR及测序鉴定。结果 PCR扩增片段与预期结果相符,双酶切证实CD147 siRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致。结论成功构建CD147 siRNA表达载体,CD147可为治疗肿瘤开辟新途径。

关键词: siRNA, 遗传载体, CD147

Abstract: Objective To construct CD147 siRNA expression vector in order to analyze the role of CD147 in the invasion and metastasis of tumors derived from skin. Methods According to CD147 cDNA sequence in the Genebank,apair of 64-nt oligonucleotides,each containing the sites of restriction endonuclease at both ends,were designed and synthesized.Oligonucleotides were annealed and ligated with linearized pSUPER by T4DNA ligase.The recombinants (named pSUPER/CD147 siRNA) were finally sequenced and identified by PCR and restriction end onuclease digestion. Results CD147 siRNA expression vector was successfully co nstructed and identified by double endonuclease digestion.Sequence analysis of inserted fragment revealed the same sequence as synthesized siRNA oligonucleotid es. Conclusions CD147 siRNA expression vector has been successfully constructed,which paves the way for studying the role of CD147 in the invasion and metastasis of tumor cells derived from skin as well as in tumor therapy.

Key words: CD147, siRNA, Genetic, Vector

陈翔, 颜克香, 谢红付, 李吉. CD147siRNA表达载体的构建与鉴定[J]. 中华皮肤科杂志, 2005, 38(6): 368-370.doi:

CHEN Xiang, YAN Ke-xiang, XIE Hong-fu, LI Ji. Construction and Identification of CD147 siRNA Expression Vector[J]. Chinese Journal of Dermatology, 2005, 38(6): 368-370.doi:

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