中华皮肤科杂志 ›› 2002, Vol. 35 ›› Issue (2): 137-139.
张亮1, 刘玉峰1, 杨乔欣2, 李巍1, 李承新1, 任君萍2, 黎志东2, 张衍国1
ZHANG Liang1, LIU Yufeng1, YANG Qiaoxin2, LI Wei1, LI Chengxin1, REN Junping2, LI Zhidong2, ZHANG Yanguo1
摘要: 目的 探索利用天然抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)淘筛噬菌体递呈的随机肽库,获得在体内具有功能活性的角蛋白模拟表位方法。方法 用角蛋白亲和层析柱从正常人混合血清中分离并纯化AK auto Ab,然后进行生物素标记;用生物素化的AK auto Ab对噬菌体递呈的随机15肽库进行3轮淘洗并进行ELISA检测;挑取23个阳性克隆进行DNA测序,分析所获数据并进行竞争实验。结果 DNA测序分析表明,AK auto Ab特异识别3个抗原表位区:SLSPMPTTNRR、PPLIPIPLRTM和TTPRPPMRIMLPRIT,其中SLSPMPTTNRR可能含有优势表位;携有这些短肽的噬菌体可与AK auto Ab特异结合,角蛋白可阻断这种特异的结合反应。结论 利用噬菌体随机肽库技术成功地获得了AK auto Ab所识别的角蛋白模拟表位。