中华皮肤科杂志 ›› 2001, Vol. 34 ›› Issue (3): 186-188.
尹跃平, 吴勤学, 张良芬, 余艳华, 龚匡隆, 尤永燕
YIN Yueping, WU Qinxue, ZHANG Liangfen
摘要: 目的 用基因工程技术制备梅毒螺旋体特异蛋白抗原,以解决梅毒螺旋体不能体外培养而难以获得足量的纯梅毒螺旋体特异蛋白抗原的难题。方法 以PCR技术克隆出目的基因,重组后通过DNA序列测定验证重组质粒中连结有目的基因片段;以pMALTM-c2为质粒载体,TB1大肠杆菌为宿主菌进行目的基因的转化、诱导和表达,并对表达产物进行蛋白印迹试验检测其血清学活性。结果 PCR克隆出梅毒螺旋体15000、17000以及47000蛋白的基因克隆,其中梅毒螺旋体17000以及47000在TB1大肠杆菌中得到稳定的表达,且表达产物显示与梅毒患者血清有非常特异的血清学反应。结论 梅毒螺旋体之目的基因在大肠杆菌中得到了成功表达,并具特异的血清学活性,从而为建立国产化梅毒血清学诊断的新方法奠定了基础。