中华皮肤科杂志 ›› 2012, Vol. 45 ›› Issue (12): 882-885.
李小静1,李志锋1,陈浩2,孙建方2
摘要:
目的 探讨不同浓度曲古菌素A对A431细胞生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45α(Gadd45α)表达及对细胞增殖、凋亡的影响。 方法 0.05、0.1、0.25、0.5、1 μmol/L曲古菌素A处理A431细胞,采用CCK8法检测曲古菌素A对A431细胞增殖的影响;流式细胞仪检测药物处理后A431细胞周期、凋亡率的变化;RT-PCR及Western印迹法检测Gadd45α mRNA及蛋白的表达。结果 不同浓度曲古菌素A均能抑制A431细胞的增殖,在一定时间范围内(6、12、24、48 h),随药物浓度增加,细胞存活率下降,具有明显剂量依赖性;同一药物浓度下,细胞存活率随时间延长而下降,有时间依赖性。0.1、0.25、0.5 μmol/L曲古菌素A作用A431细胞24 h后,G1期细胞比例依次为26.910% ± 0.799%、30.406% ± 0.625%、32.896% ± 0.599%,较对照组(21.633% ± 1.144%)显著增高(F = 105.93,P < 0.05);A431细胞早期凋亡率、晚期凋亡率均有递增的趋势;A431细胞Gadd45α mRNA表达随浓度增加而表达增强;Western印迹结果显示,A431细胞Gadd45α蛋白A值分别为0.6536 ± 0.2193、0.6990 ± 0.0110、0.9040 ± 0.1971,较对照组(0.3766 ± 0.0241)增高(F = 332.88,P < 0.05)。 结论 曲古菌素A在体外可诱导A431细胞上调Gadd45α表达;Gadd45α可能参与了曲古菌素A处理后A431细胞的抑制增殖、诱导凋亡过程。