中华皮肤科杂志 ›› 2012, Vol. 45 ›› Issue (11): 813-815.
赵信1,满孝勇1,李伟1,周炯1,陈佳琦1,蔡绥勍2,郑敏3
摘要:
目的 探讨激活素受体样激酶1(ALK1)在系统性硬化病患者皮肤成纤维细胞中的表达及其在纤连蛋白和Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)产生中的作用。方法 Western 印迹和免疫荧光法观察比较ALK1在14例健康人和12例系统性硬化病患者皮肤成纤维细胞中的表达,并设计针对ALK1的特异性小干扰RNA(siRNA),利用转染试剂将ALK1 siRNA瞬时转染至原代培养的健康人皮肤成纤维细胞中。转染后的细胞分两组,一组用无血清培养基OPTI-MEM培养,另一组在OPTI-MEM中加入转化生长因子?茁1(TGF?茁1)。培养72 h后,Western 印迹检测纤连蛋白和PAI-1蛋白量的变化。结果 Western 印迹和免疫荧光法结果显示,ALK1在健康人和系统性硬化病患者皮肤成纤维细胞中均有表达,且在系统性硬化病患者中的表达量明显高于健康人;免疫荧光结果显示,在成纤维细胞中ALK1位于胞膜和胞质中。转染了ALK1 siRNA的成纤维细胞其ALK1、纤连蛋白和PAI-1蛋白表达水平分别下降90%、58%和31%。TGF?茁1可显著促进对照siRNA组成纤维细胞表达ALK1、纤连蛋白和PAI-1,而ALK1 siRNA则显著抑制TGF?茁1诱导的ALK1、纤连蛋白和PAI-1的增加。 结论 TGF?茁1可通过ALK1诱导成纤维细胞纤连蛋白和PAI-1的表达,ALK1可能参与了系统性硬化病中纤维化的形成。