中华皮肤科杂志 ›› 2017, Vol. 50 ›› Issue (11): 800-805.doi: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2017.11.006
罗勇奇 曾迎红 胡梦叶 汤建萍
Luo Yongqi, Zeng Yinghong, Hu Mengye, Tang Jianping
摘要: 目的 研究普萘洛尔对体外培养的血管瘤内皮细胞(HemEC)增殖及凋亡的影响,探讨其分子机制。方法 收集7例增生期血管瘤患儿的手术切除血管瘤组织用于体外培养HemEC,同时培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为对照。采用0、25、50、75、100、125、150 μmol/L普萘洛尔分别处理两种细胞24、48、72 h。MTT法检测各组细胞的存活率,流式细胞仪检测凋亡率。采用含或不含100 μmol/L普萘洛尔的培养基分别培养HemEC(分别为普萘洛尔干预组及空白对照组)18 h,提取两组细胞总RNA,采用表达谱基因芯片技术检测两组HemEC中差异表达的基因,并通过实时定量PCR验证。结果 25 μmol/L普萘洛尔作用24、48 h可引起HemEC轻微增殖(P < 0.05),而 ≥ 100 μmol/L普萘洛尔作用 ≥ 24 h可引起HemEC存活率下降,作用 ≥ 48 h可引起HUVEC存活率下降。100 ~ 150 μmol/L普萘洛尔作用24 ~ 72 h,HemEC细胞存活率比HUVEC低(P < 0.05)。100 ~ 150 μmol/L普萘洛尔作用下,HemEC凋亡率随普萘洛尔作用时间及浓度逐渐升高(均P < 0.05)。普萘洛尔干预HemEC后,表达谱基因芯片技术筛选出186个表达差异倍数 ≥ 1.5的基因,其中表达明显上调的基因128个,明显下调的58个。实时定量PCR显示,普萘洛尔干预组前蛋白转化酶枯草溶菌素9 mRNA表达水平为空白对照组的(9.88 ± 2.19)倍,脂肪酸结合蛋白3 mRNA为(21.90 ± 8.18)倍,差异均有统计学意义(t = 7.028、4.427,P < 0.05)。结论 高浓度普萘洛尔对HemEC及HUVEC的增殖均有抑制作用,且对HemEC的抑制作用更强。普萘洛尔抑制HemEC的增长可能与抑制HemEC增殖及促进其凋亡有关。
罗勇奇 曾迎红 胡梦叶 汤建萍. 普萘洛尔对体外培养血管瘤内皮细胞的影响及其分子机制[J]. 中华皮肤科杂志, 2017,50(11):800-805. doi:10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2017.11.006
Luo Yongqi, Zeng Yinghong, Hu Mengye, Tang Jianping. Effects of propranolol on in vitro cultured hemangioma endothelial cells and their mechanisms[J]. Chinese Journal of Dermatology, 2017, 50(11): 800-805.doi:10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2017.11.006