中华皮肤科杂志 ›› 2017, Vol. 50 ›› Issue (10): 719-723.doi: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2017.10.006
梁颖红,魏明,刘佳,龚艳杰,陈河涛,涂玲,张宜花
Liang Yinghong, Wei Ming, Liu Jia, Gong Yanjie, Tu Ling, Zhang Yihua
摘要: 目的 研究微小核糖核酸(miRNA)?203在寻常性银屑病患者皮损中的表达,并探讨对角质形成细胞株(HaCaT细胞)增殖的影响。方法 取2014—2016年23例寻常性银屑病患者的皮损组织和相邻非皮损组织。荧光定量PCR法检测组织中miRNA?203的表达水平,并以5′端、3′端地高辛标记的探针对皮肤组织切片中目的miRNA进行原位杂交,观察miRNA?203在皮肤组织中的定位情况。将miRNA?203模拟物(miRNA?203模拟物组)和miRNA?203模拟物阴性对照(阴性对照组)分别转染HaCaT细胞,正常细胞培养组作为空白对照组,采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪和Western印迹法分别对HaCaT细胞的增殖、细胞周期及相关周期蛋白(Cyclin D1、Cyclin B1)的变化进行检测。结果 miRNA?203特异性地表达在表皮的角质形成细胞中,除细胞核外,细胞质亦有表达,且寻常性银屑病患者皮损组织中miRNA?203表达水平(1.35 ± 0.28)显著高于非皮损组织(0.52 ± 0.09),差异有统计学意义(t = 6.76,P = 0.012)。转染miRNA?203模拟物能抑制HaCaT细胞增殖(F = 9.36,P = 0.007),且空白对照组、阴性对照组和miRNA?203模拟物组HaCaT细胞增殖率均随时间的延长逐渐增加(F = 18.68,P < 0.001)。与阴性对照组和空白对照组相比,miRNA?203模拟物组HaCaT细胞被阻滞在G2/M期(G2/M期细胞比例:31.33% ± 4.56%比17.02% ± 3.53%、16.67% ± 3.32%,均P < 0.05),HaCaT细胞周期蛋白周期蛋白D1表达水平较高(1.15 ± 0.13比0.52 ± 0.05、0.56 ± 0.07,均P < 0.05),而周期蛋白B1水平较低(0.43 ± 0.08比0.93 ± 0.16、0.91 ± 0.0.15,均P < 0.05)。结论 miRNA?203可能参与了寻常性银屑病的发生发展过程。
梁颖红 魏明 刘佳 龚艳杰 陈河涛 涂玲 张宜花. MiRNA-203在寻常性银屑病皮损的表达及其对HaCaT细胞增殖的影响[J]. 中华皮肤科杂志, 2017,50(10):719-723. doi:10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2017.10.006
Liang Yinghong, Wei Ming, Liu Jia, Gong Yanjie, Tu Ling, Zhang Yihua. Expression of miRNA-203 in psoriasis vulgaris skin lesions and its effect on the proliferation of HaCaT cells[J]. Chinese Journal of Dermatology, 2017, 50(10): 719-723.doi:10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2017.10.006